產品簡介
RNA免疫沉淀(RIP)運用針對目標蛋白質的抗體把相應的RNA-蛋白質復合物沉淀下來,經過分離純化并對結合在復合物上的RNA進行測序或PCR分析。RIP可應用于研究miRNA調節靶點、RNA與RNP(RNA結合蛋白)的互作關系等。
實驗流程
1 細胞裂解
2 捕獲RNA-蛋白復合物
3 洗脫
4 檢測
實驗實例
以anti-SNRNP70為目的抗體,anti-IgG為對照抗體,在Hela細胞裂解樣本中,進行免疫沉淀。免疫沉淀所得蛋白質樣品,進行Western blot檢測,input樣本與目的樣本在約70KDa大小位置有明顯條帶,陰性對照樣本無條帶。
免疫沉淀所得RNA以U1 snRNA特異性引物,進行RT-PCR分析,input樣本與目的樣本可見明顯的PCR產物,指示SNRNP70富集U1 snRNA。
Western blot檢測SNRNP70:
PCR檢測U1 snRNA: