細胞培養和血清制品制備中極易發生支原體污染，被污染早期往往難以察覺，嚴重影響實驗結果。常用的支原體檢測方法有直接培養法、DNA染色法和PCR法等，其中實時熒光定量PCR法（qPCR）在檢測準確率、特異性和敏感性上都有明顯的優勢。
圖1 不同檢測方法的比較（Molla Kazemiha et al., 2016）
GSDetectTM Taqman Mycoplasma Detection Kit (UNG plus) 基于Taqman qPCR法，針對支原體16S rRNA的保守區域序列，設計特異性引物和熒光探針（FAM標記）用于支原體DNA的檢測。本試劑盒可直接以細胞培養上清或血清等生物材料為模板，檢測常見的16種支原體污染。
試劑盒內添加dUTP/UNG酶體系，能避免PCR產物氣溶膠污染導致的假陽性，大幅提高檢測的準確性。
產品特點
1 操作簡便，直接使用1 μL細胞培養上清或血清進行檢測，無需提取DNA。
2 檢測靈敏度高，準確率高，耐受青霉素和鏈霉素或其他抑制物的影響。
3 特異性強，只能擴增支原體DNA，不會擴增細菌真菌或真核細胞的DNA。
4 檢測快速，最快1小時即可判定結果。
產品組分
D0101
24 rxns
D0102
96 rxns
4×280 μL
特異性引物、探針等
4×304 μL
100 μL
200 μL
組分名稱
規格 主要成分
GSDetectTM Myco Mix A 280 μL 特異性引物、探針等 GSDetectTM Myco Mix B 304 μL 熱啟動Taq酶、UNG酶等 Myco-Positive Mix 25 μL 含陽性序列的DNA片段 Myco-Free Water 50 μL 支原體陰性的超純水
GSDetectTM Myco Mix A GSDetectTM Myco Mix B 熱啟動Taq酶、UNG酶等 Myco-Positive Mix 含陽性序列的DNA片段 Myco-Free Water 支原體陰性的超純水
| M. orale* | M. mycoides | M. capricolum | M. arthritidis |
| M. gallisepticum | M. hominis* | M. hyorhinis* | M. penetrans |
| M. pirum* | M. salivarium* | M. synoviae | M. arginini* |
| M. fermentans* | M. pneumoniae | M. genitalium | A. laidlawii* |
參考文獻
1. Nikfarjam L, Farzaneh P. Prevention and detection of Mycoplasma contamination in cell culture. Cell J. 2012 Winter;13(4):203-12.
2. Molla Kazemiha V, Bonakdar S, Amanzadeh A, Azari S, Memarnejadian A, Shahbazi S, et al., Real-time PCR assay is superior to other methods for the detection of mycoplasma contamination in the cell lines of the National Cell Bank of Iran. Cytotechnology. 2016 Aug;68(4):1063-80.
產品說明書